当斐林试剂遇到还原性糖时,就会产生砖红色的沉淀，这种现象是因为试剂中的二价双酒石酸盐负离子螯合物起到了氧化剂和活化剂的作用，在适当的温度下，如果被测物质中含有醛基，那么就会展现出阳性反应，即生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
除了检测含醛基的化合物外,斐林试剂还常用于检验含有羰基的化合物是否属于醛或酮，在需要使用斐林试剂的情况下，都会在实验室里进行准备，这包括将两种试剂，斐林试液A和斐林试液B，按照一定比例混合后得到深蓝色的斐林试剂，斐林试液A是一份蓝色的硫酸铜水溶液，而斐林试液B则是包含酒石酸钾钠和强碱氢氧化钠的无色透明混合溶液，通过这样的方式，就可以得到一种能够在实验中使用的斐林试剂了。
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